30 Rock volvió para una tercera temporada como parte de la programación de otoño, emitiéndose justo después de The Office. La serie comenzó a sufrir una subida de audiencia después de que Tina Fey interpretara a Sarah Pallin en SNL, actuación muy aclamada. También es la temporada en la que hizo historia en los Emmy, siendo nominada para 22 premios Emmy. La temporada estuvo compuesta de 22 episodios. Oprah Winfrey apareció como invitada especial en el segundo episodio, interpretándose a ella misma, así como Jennifer Aniston interpretando a una ex compañera de habitación de Liz. Salma Hayek también aparece en múltiples episodios como la nueva novia de Jack Donaghy, Elisa. Otros invitados especiales esta temporada son John Lightow, Megan Mullally y Steve Martin. Jon Hamm interpreta al vecino de Liz en el cual tiene puesto un interés romántico en varios episodio. Alan Alda apareció en el doble episodio final de la temporada como Milton Greene, el padre biológico de Jack. El final de temporada muestra a muchos invitados del mundo de la música, incluyendo a Talib Kweli, Michael McDonald, Norah Jones, Steve Earle, Clay Aiken, the Beastie Boys, Mary J. Blige, Elvis Costello, Sheryl Crow, Rhett Miller, Cyndi Lauper, Adam Levine, Sara Bareilles, Wyclef Jean, y Rachael Yamagata, interpretando «Kidney now!», en un una campaña de donación de órganos como una parodia de «We Are the World» y «Just Stand Up!»

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